本发明公开了核桃降血压活性肽及其制备方法与应用。所述方法包括将核桃蛋白变性后用蛋白酶酶解，收集核桃肽；将所述核桃肽经分子量分级后脱苦，获得核桃降血压活性肽；所述变性采用微波结合超声波的处理方式，使核桃蛋白适度变性，提高了核桃蛋白水解程度，增加了核桃肽得率，提高了制备效率；所述脱苦是在分子量分级后进行的，使降血压活性较高的肽段得到富集。本发明方法获得的核桃肽具有明确的体内和体外降血压活性，并用β-环状糊精有效掩盖了苦味，容易吸收，感官品质良好，可广泛地应用到功能食品、保健品、食品添加剂中。