本发明涉及水产养殖动物病害防治技术，具体的说是一种鳗弧菌（Vibrio anguillarum）01血清型灭活疫苗及其制备和使用方法。疫苗为鳗弧菌（Vibrio anguillarum）01血清型，所述鳗弧菌（Vibrio anguillarum）01血清型菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期2012年12月07日，保藏号分别为CGMCC No.6942。本发明灭活疫苗可有效刺激养殖鱼类产生特异性免疫应答，并有效增强养殖动物的的免疫力，保护易感鱼类免受致病性鳗弧菌的感染。制备本发明的鳗弧菌灭活疫苗，所使用的材料成本低,对动物和环境安全。