本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种羟乙基壳聚糖原位水凝胶的制备方法，首先将高碘酸钠粉末溶于去离子水中，制得高碘酸钠水溶液，然后搅拌海藻酸钠水溶液与高碘酸钠水溶液形成混合液使其进行氧化反应后加入乙二醇终止反应，抽滤混合液并用无水乙醇脱水沉淀后低温真空干燥制得氧化海藻酸钠粗品，再用蒸馏水溶解成氧化海藻酸钠粗品水溶液，将其透析完全后进行离心取上清液冷冻干燥制得氧化海藻酸钠，最后将羟乙基壳聚糖与氧化海藻酸钠混合经双联注射器交联反应挤推至试管中得羟乙基壳聚糖原位水凝胶，用于角膜缘干细胞的快速包封移植；其制备工艺简单，原理安全可靠，制备成本低，产品质量好，使用安全，卫生，治疗环境友好。