本发明提供了一种三维平行胶原纤维－蚕丝支架及其制备方法，所述支架由编织蚕丝基架和包覆在编织蚕丝基架上、下方表面的平行胶原纤维层构成，所述的编织蚕丝基架是由蚕丝编织成网孔大小为0.25～25mm²的网片结构，所述平行胶原纤维的孔隙直径大小为10～300um，所述的编织蚕丝是去除了丝胶蛋白的编织蚕丝；所述支架可作为生物支架应用于肌腱/韧带的修复；本发明三维平行胶原纤维－蚕丝支架制作方法简单，生物相容性好，力学性能佳，支架的拓扑结构与肌腱/韧带相似，能够促进其表面生长的干细胞向肌腱/韧带分化，促进肌腱/韧带再生。