本发明公开了一种资源化利用牛粪制备发酵床垫料的方法，该工艺资源化利用程度高、易于大规模应用，有助于实现牛养殖废弃物无害化处理及发酵床垫料资源化利用，解决目前存在的牛养殖环境污染及发酵床垫料资源短缺两大难题。本申请以牛粪便为原料，辅以秸秆、蚯蚓粪、酒精活性污泥等，通过生物发酵剂的二步发酵工艺制得，发酵床垫料中富含酵母菌、米曲霉、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、乳酸菌等益生菌，含量高达2～5×10cfu/g，用于兽养殖后，兽发病率低，有利于促进兽的生长。