本发明提供一种小鼠异基因骨髓移植后慢性移植物抗宿主病（cGVHD）模型的建立方法，通过制备异基因CB6F1（H-2^bxd）雄性供鼠的骨髓和脾细胞，尾静脉输注给BALB/c（H-2^d）雌性受鼠造模而实现。该模型造模方法具有模拟临床上异基因造血干细胞移植后慢性移植物抗宿主病的发生发展特点；过程简单易行，建模效率高，重复性好，国内外尚无相同报道；特别是肺部、皮肤的典型病理改变，为在活体动物内进行防治人类cGVHD的研究提供实验平台。