本发明公开了一种可用细胞培养的纳米纤维膜的制备方法。玉米醇溶蛋白/聚乙烯醇纳米纤维膜是一种细胞培养载体材料，该材料包括生物可降解天然高分子玉米醇溶蛋白，生物相容高分子聚合物聚乙烯醇。玉米醇溶蛋白/聚乙烯醇纳米带状纤维，纳米纤维的横向尺寸为625-3920纳米，纳米纤维无规堆积成纳米纤维膜。玉米醇溶蛋白/聚乙烯醇纳米纤维膜是经静电纺丝加工制得，制备方法简单有效、制备装置简单、稳定性好，可通过静电纺丝工艺条件的变化，调节纳米纤维的直径、膜材料的孔隙率等指标。实验证实了玉米醇溶蛋白纳米纤维膜材料与普通PC板相比有助于小鼠胚胎干细胞的增殖，培养五天干细胞克隆直径达100μm。且纤维膜经120℃蒸压30分钟后可回收再使用。