本发明涉及细胞生物学领域，特别涉及一种汗腺分化诱导培养基及其应用。该培养基是在低糖DMEM培养基中添加以下成分：以低糖DMEM培养基体积计，胎牛血清体积分数8-15％，半琥珀酰氢化可的松0.3-0.5μg/ml，rh-KGF 10-100ng/ml，三碘甲状腺原氨酸1-3nmol/ml，rh-EGF 10-100ng/ml，胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠溶液0.05-0.2ml/ml。该汗腺分化诱导培养基以重组人角化细胞生长因子作为关键调控因子，构建出成品化的汗腺分化诱导培养基，诱导人脐带间充质干细胞向汗腺样细胞分化，结果稳定可靠，可广泛用于多种MSCs向汗腺细胞分化诱导的相关研究及临床应用。