本发明涉及细胞培养领域，尤其涉及一种细胞培养液及其在培养巨核祖细胞中的应用。本发明将WNT3a蛋白、胰岛素、Flt-3L、白蛋白、非必需氨基酸、血小板生成素、干细胞生长因子，白介素3和白介素6进行复配，添加入基础培养基，能够给细胞提供更加丰富的营养。实验表明，本发明提供的培养液用于巨核祖细胞的培养，能够选择性的促进巨核祖细胞的生长和增殖。以本发明提供的培养基培养巨核祖细胞20天，细胞数量增殖400倍～450倍，所得细胞中CD34+、CD41+双阳性表达率不低于35％。该效果显著优于现有技术的培养基(p<0.01)。