本发明属于动物细胞培养技术领域，具体涉及一种利用兽去分化脂肪细胞诱导分化形成骨骼肌细胞的方法。本发明通过胶原酶消化法分离兽皮下脂肪组织的成熟脂肪细胞，去分化形成去分化脂肪细胞(DFAT细胞)。DFAT细胞与间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有相似的功能特性，能够在体外高效增殖和诱导多向分化。另外，本发明成功将兽DFAT细胞在体外利用半乳糖凝集素-1(Galectin-1)蛋白的诱导，分化形成能够表达骨骼肌细胞特异性标志分子的多核细胞。