本发明公开了一种来源于外周血Vδ1γδT细胞的体外激活扩增方法，所述的方法为：取外周全血，采用密度梯度离心及免疫磁珠分选的方法收集总γδT细胞；将总γδT细胞用含改良1640培养基作为培养液重悬，在5％CO₂、37℃条件下进行细胞培养，每2-3天换新鲜培养液，获得体外激活扩增的以Vδ1γδT亚群为主的γδT细胞；本发明的原料获取方便，不存在伦理问题，具备极强的使用价值；本发明所获得的细胞具有较高杀伤实体肿瘤细胞、肿瘤干细胞和血液系统肿瘤细胞的细胞毒活性；本发明获得细胞的方法简单，高效，成本低。