本发明属于细胞领域，公开了一种诱导牛胎儿成纤维细胞重编程的方法。本发明所述方法为牛胎儿成纤维细胞经毛地黄皂苷溶液透化处理后与爪蟾卵母细胞抽提物共孵育，用含2mM CaCl₂的全培养基封闭细胞膜上的可逆孔道，然后抽提物处理培养基培养诱导牛胎儿成纤维细胞重编程获得牛胎儿成纤维多能干细胞。本发明所述方法高效、稳定、安全。本发明所述牛胎儿成纤维多能干细胞碱性磷酸酶染色呈阳性，组蛋白H3K9乙酰化程度降低，有Oct-4蛋白及多能性标志基因Oct-4、Nanog的表达，表明牛胎儿成纤维细胞发生了重编程，细胞基因表达方式发生改变，表现干细胞特性，恢复部分发育全能性，可作为核供体制备克隆胚胎进行体细胞克隆。