本公开涉及分离的层粘连蛋白-521、制备重组层粘连蛋白-521的方法、表达重组层粘连蛋白-521的宿主细胞、以及包含层粘连蛋白-521的组合物。层粘连蛋白-521能够保持干细胞在体外的多能性，允许自我更新，并使人胚胎干细胞能够单细胞存活。在被重组层粘连蛋白-521(层粘连蛋白-11)包被的平板中，当在分化抑制剂或饲养细胞不存在的条件下培养多能人胚胎干细胞时，胚胎干细胞增殖并保持它们的多能性。还发现人重组层粘连蛋白-521(层粘连蛋白-11)使得干细胞在完全解离为单细胞悬液后能够单细胞存活。本文还公开了有用的细胞培养基，其包含至多3.9ng/ml的β成纤维细胞生长因子(bFGF)。