本发明提供一种树突状细胞肿瘤疫苗，其为树突状细胞和癌干细胞共同培养而得。本发明另提供一种树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法，自肿瘤组织中分离癌干细胞，并经由流式细胞仪筛选出癌干细胞，以放射线照射目标癌干细胞后，与树突状细胞共同培养，以得树突状细胞肿瘤疫苗。