本发明公开了一种诱导肿瘤干细胞向淋巴管内皮细胞分化的无血清培养基及方法，所述无血清培养基含有基础培养基、添加物，所述添加物包括转铁蛋白、β-巯基乙醇、胰岛素、牛血清白蛋白、肝素钠、生长因子VEGF-C等。诱导分化方法为将肿瘤干细胞与基底膜BME混合后，添加无血清培养基培养15～30天。本发明的无血清分化诱导培养液中添加了VEGF-C，对诱导肿瘤干细胞向淋巴管的发育和形成过程中起着决定性作用。本发明的诱导分化方法操作简便，不需对细胞进行复杂的处理，不会对细胞造成物理的、化学的损伤，适用范围广。