本发明提供了一种羧甲基纤维素/海藻酸钠干细胞微囊及其制备和培养方法，制备方法包括：将海藻酸钠于水中分散后再加入待培养的干细胞，制成海藻酸钠和干细胞的混合悬液；将羧甲基纤维素用体积分数1～2％的醋酸分散，制成羧甲基纤维素溶液；将混合悬液加入至羧甲基纤维素溶液中进行凝聚。本发明制备微囊相比通常的聚赖氨酸/海藻酸钠细胞培养微囊，其包膜结构为羧甲基纤维素和海藻酸钠形成的半互穿网络结构，具有良好的溶胀、缩胀等性能，用于细胞培养时其透性和稳定性上更好一些，能形成较好的细胞生长环境，提升细胞培养扩增的效率。