本发明公开了一种诱导小鼠诱导型多能干细胞骨向分化的方法及其培养基。本发明提供的方法是将小鼠多能干细胞接种到分化培养基I中形成间质细胞富集的拟胚体，再分离拟胚体并在分化培养基II中培养获得成骨细胞。本发明公开的分化培养基I是在成纤维细胞培养基基础上添加全反式维甲酸和碱性成纤维细胞生长因子，分化培养基II是在成骨细胞培养基的基础上降低D-葡萄糖含量，并添加BMP4或BMP7。本发明提供方法和培养基能够显著促进小鼠多能干细胞的骨向分化，具备周期短、分化率高、效果稳定等特点，具有广阔的应用前景和实用价值。