hTERT重组慢病毒永生化人脱落乳牙牙髓干细胞系的方法，包括以下步骤：步骤一、原代人脱落乳牙牙髓干细胞SHED的原代培养：步骤二、稳定表达hTERT基因的永生化人脱落乳牙牙髓干细胞hTERT-SHED的构建，本发明利用构建的表达hTERT基因的永生化基因工程细胞，作为研究人脱落乳牙牙髓干细胞生物学特性的有效细胞模型，有利于深入研究在牙周组织工程中作为种子细胞的应用，不同药物对细胞发挥作用和相关机制的信号转导通路，以及利用其筛选有效的治疗慢性牙周炎的中药有效成分，为后续研究牙周组织修复重建的机制、研发新型有效的药物提供有力的工具。