本发明公开一种室内生物絮团的培养方法，包括计算外源碳源添加量，维持水体中的C/N比在10-15:1之间，待水体颜色由清色或者白色向淡黄色转变时开始调节充气量，使得溶解氧维持在1.0毫克/升以下，外源碳源是葡萄糖和蔗糖的混合物。本发明的生物絮团培养方法，可实现在室内不充或少充氧条件下成功培育生物絮团，克服目前只能在充分曝气下培养生物絮团的缺陷，实现在室内养殖中利用生物絮团培养技术。本项技术的应用，可促进水体内异养细菌大量繁殖、加快生物絮团的形成，降低养殖水体中的亚硝酸盐和氨氮的含量，减少养殖用水的换水量。本发明降低了养殖水体中有害物质的积累，提高了饲料利用效率，从而提高养殖产量，增加养殖收益。