本发明提供一种用于生物技术领域的诱导多能干细胞培养基，其应用及培养方法。以IMDM/F12为基础培养基，每500mL IMDM/F12基础培养基中包括以下浓度的组分：重组人胰岛素，重组转铁蛋白，维生素C，人白蛋白，bFGF，PDGF-bb，EGF，IGF-1，TGF-β，纤维连接蛋白，Fetuin，Betacellulin，β-mercaptoethanol，Thiazovivin。本发明的诱导多能干细胞培养基中完全不采用动物血清，从而有效避免了带有动物源性病院体的风险，提高了诱导多能干细胞在临床上应用的安全性。本发明的培养基可以使诱导多能干细胞增殖速度快，在临床上具有很大的应用价值。