本发明属于干细胞领域，尤其涉及一种铁皮石斛干细胞冻干粉的制备方法及其用途。其制备方法是将去根冠的铁皮石斛根尖对其清洗、消毒后利用固体培养基分离其干细胞，再利用液体培养基对其进行传代配养，过滤后冻干制成铁皮石斛干细胞冻干粉。经试验证明，本发明制得的铁皮石斛干细胞冻干粉可以有效提高细胞内SOD酶的活性，降低MDA的含量，减少因紫外线辐射诱导产生的氧自由基对细胞的攻击和损害，降低细胞的死亡率，保持体内抗氧化平衡系统，从而起到保护细胞的作用，达到抗衰老的效果。