本发明公开了一种用于男性来源多能干细胞向生殖细胞分化的无动物源性组分培养方法，在无血清、无动物源性蛋白培养液的条件下，使男性来源多能干细胞在体外分化过程中产生类精原干细胞、单倍体细胞。本发明还公开了一种无血清、无动物源性蛋白培养液体系。本发明提出的无血清、无动物源蛋白培养方法，操作简单、可重复性强，具有广泛的临床应用价值，为生殖细胞发生机理研究，及男性非梗阻性无精子症的诊断、治疗提供了基本技术平台。