本发明涉及一种人胚胎干细胞体外定向诱导分化为角化细胞的细胞外基质筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤(1)：使用至少一种诱导剂对人胚胎干细胞进行定向诱导，得到诱导分化成的角化细胞；步骤(2)：将角化细胞分组接种于至少一种细胞外基质包被的培养皿中培养，得到分组培养后的角化细胞组；步骤(3)：观察角化细胞组的生长情况，检测其增殖能力、CK14的表达量并测定其灰度值，筛选出增值能力最强、表达量和灰度值最好的角化细胞组，并得出该角化细胞组采用的细胞外基质。其通过对E-KCS的生物活性、增殖能力及角化细胞标志物CK14表达量的检测发现细胞增殖能力最强，最能促进E-KCS生长的细胞外基质，简便，易行。