本发明提供一种人脐带间充质干细胞的无血清培养基，属于干细胞技术领域，包括DMEM基础培养基，还包括如下组分：重组人胰岛素、人血清白蛋白、转铁蛋白、纤维连接蛋白、维生素C、生物素、干细胞生长因子和干细胞因子。本发明提供的人脐带间充质干细胞的无血清培养基无需进行培养瓶包被，操作简便，细胞增殖速率高，且保持了良好的干细胞幼稚形态和干细胞特性，具有良好的细胞诱导分化潜能，降低了成本。