本发明提供了一种胎盘间充质干细胞分离和体外扩增培养相结合的方法用以制备胎盘间充质干细胞注射剂；当采用收集胎盘组织细胞后，先进行原代细胞的贴壁扩增，再行正、负向免疫分选结合的方法纯化胎盘间充质干细胞，获得C D34↑[-]C D105↑[+]细胞，在无血清体外培养体系中继代扩增培养。本发明方法每次只需少量原代细胞，就可以达到比较好的分选效果，可进一步提高了胎盘间充质干细胞的纯化率。所用培养体系不但对胎盘间充质干细胞具有明显的扩增优势，并且扩增的细胞具备多分化潜能。可在纯化胎盘间充质干细胞和体外扩增培养中应用。