本发明公开了一种将大鼠脂肪间充质干细胞诱导成角膜上皮样细胞的方法，以解决角膜上皮替代物稀缺的问题。本发明采用一种转录因子基因--paired box 6基因，将其转染进入大鼠脂肪间充质干细胞，诱导细胞转分化为角膜上皮样细胞，方法清晰、简便，鉴定结果证实可靠；用本发明方法获得的角膜上皮样细胞，能够用于修复角膜上皮的损伤，并形成完整的复层角膜上皮（鉴定试验已经证实），作为一种干细胞治疗药物，具有潜在的临床应用前景；此角膜上皮样细胞，用于构建组织工程角膜上皮，具有较大的市场应用前景。