本发明提供了一种临床级胎盘间充质干细胞的制备方法，具体地，本发明方法包括：对经剪碎的胎盘组织材料，用组合消化酶进行消化，从而获得经消化的组织混合物，其中所述的组合消化酶包括胶原酶IV和胰蛋白酶；加入红细胞裂解液，从而获得经红细胞裂解处理的混合物；离心，获得沉淀，即为原代间充质干细胞；对上一步骤的所述原代间充质干细胞进行无血清传代扩增，从而获得经传代的临床级胎盘间充质干细胞。本发明方法制备的细胞其细胞纯度高、增殖能力强、可保证细胞临床使用需要。