利用小分子化合物诱导干细胞向心肌分化的方法，涉及干细胞生物学与再生医学领域。所述小分子化合物为一类氨基甲酸酯类化合物(I)或其可药用盐、水合物、溶剂合物和异构体。将小分子化合物加入分化培养基中，直接作用于受试细胞，根据受试细胞形态、生长状态及鉴定情况，持续使用小分子化合物，直至受试细胞内相应的目标基因表达水平升高，分化为心肌样细胞；所述干细胞包括胚胎干细胞、诱导多能性干细胞和间充质干细胞。实验证实在干细胞分化培养基中加入该类诱导剂后，干细胞向心肌细胞分化的比例明显提高。含有一类氨基甲酸酯类化合物或其可药用盐、水合物、溶剂合物和异构体的分化培养基可诱导干细胞向心肌细胞分化。