本发明公开了一种脂肪间充质干细胞的构建方法与应用，属于生物技术领域。本发明在体外扩增大鼠OX40和ICOS的胞外段编码区，同时扩增人IgG Fc段编码区，构建重组OX40Ig和ICOSIg融合蛋白表达载体；应用核转染技术将含有OX40Ig和ICOSIg融合蛋白的表达载体导入大鼠ADSCs，得到OX40Ig和ICOSIg基因修饰的脂肪间充质干细胞。本发明不仅保持自身的免疫调节作用，同时增加对T淋巴细胞活化过程中共刺激通路的阻断，提高基因治疗和细胞治疗间相互协同、促进作用，为诱导脂肪间充质干细胞介导的免疫耐受，及临床用于器官移植排斥反应、诱导器官移植长期存活提供解决方法和实验依据，应用前景广阔。