本发明为一种人类骨髓、脐带血或外周血中干细胞样本密度分离液及干细胞分离方法。所述试剂由1号液、2号液和3号液组成。本发明在1号液中加入了脑蛋白水解物，有效提高了处理样品的干细胞回收数量。使用本发明的干细胞样本密度分离液，目标干细胞分离回收率提高了约20～30％，可以有效节约人类骨髓、脐带血或外周血样品，在保持高存活率的基础上，大大地提高了干细胞的分离数量和回收率使用效率，在应用干细胞临床治疗中是一个前所未有的突破。