本发明提供了一种制备胎盘造血干细胞制剂的方法，该方法包括如下步骤：(1)用酶溶液消化胎盘组织，得到消化产物并去除所述消化产物中的组织残渣，得到酶解液；(2)将所述酶解液与羟乙基淀粉溶液混合并使混合得到的物料分层，得到上层的有核细胞悬液；(3)将所述有核细胞悬液与冻存液混合；其中，所述酶溶液含有Ⅰ型胶原酶、DNA酶I、分散酶和透明质酸酶；所述冻存液中含有二甲基亚砜、羟乙基淀粉、人血白蛋白和右旋糖酐。通过上述技术方案，本发明能够在提高胎盘造血干细胞分离效率的同时，还能使冻存的胎盘造血干细胞在升温至常温后直接用于干细胞治疗。