本发明涉及干细胞领域，公开了一种间充质干细胞的培养基及其大规模培养方法。本发明所述间充质干细胞的培养基包括无血清培养基和EGF和PDGF，其中所述EGF浓度为5-10ng/mL，PDGF浓度为5-10ng/mL。本发明所述间充质干细胞的大规模培养方法，取原代分离培养的P1代间充质干细胞，用所述间充质干细胞的培养基调整接种密度为2×10⁴/mL-3×10⁵/mL，培养至细胞融合度达80％～90％后记为P2代，重复传代至P10代细胞。本发明所述培养基降低细胞污染几率，同时促进MSC扩增，延缓MSC在体外培养的老化速度。本发明所述大规模培养方法可获得大量高纯度间充质干细胞，且能保持间充质干细胞良好的干细胞特性。