本发明涉及一种巴马小型兽精原干细胞诱导精子细胞的方法，属于干细胞生物工程。本发明公开一种巴马小型兽精原干细胞诱导精子细胞的方法，包括配制培养基、制作STO饲养层、精原干细胞诱导精子细胞、精子细胞鉴定四个步骤，所述配制培养基包括配制STO培养液和精原干细胞培养液，STO培养液由基础培养基DMEM/F12、FBS、β-巯基乙醇、丙酮酸钠、青霉素、链霉素组成；精原干细胞培养液由基础培养基DMEM/F12、BSA、丙酮酸钠、B27添加物、GDNF、bFGF、GFRα1、β-巯基乙醇、青霉素、链霉素组成。本发明应用对象是兽，和已有的技术方案应用对象不同，扩大了科研范围。