本发明提供了一种简单、高效分离脐带间充质干细胞的方法，包括：使用插管分离脐带间充质干细胞以及使用trypLE^TM消化和无血清培养基培养脐带间充质干细胞的步骤。本发明能够更快的得到完全来自母体的脐带间充质干细胞，而且对细胞的损伤更小；经试验证明本发明的方法能最大可能的保护间充质干细胞，具有更高活率，以及有更高的活性，可以更加有效进行成脂、成骨诱导分化。