一种脐带间充质干细胞体外培养和扩增方法，包括脐带清洗、破碎消化、流式细胞仪分选和扩增培养等步骤。本发明提供的脐带间充质干细胞体外培养和扩增方法，特别筛选并获得CD271⁺细胞，配合使用10v/v%自体血清并加入50ng/mlHSP90培养6天后获得。验证发现，由此培养出的细胞不但具有常规间充质干细胞的表面标志，而且细胞增殖能力也强于常规方法培养出的间充质干细胞。