一种从脐带分离和培养间充质干细胞并向软骨细胞诱导分化的方法，其包括脐带处理、从脐带和脐血管中分离细胞并进行原代细胞培养、细胞传代培养获得间充质干细胞及将间充质干细胞诱导分化为软骨细胞，其中，从脐带和脐血管中分离细胞中包括采用消化液对脐带和脐血管进行消化。本发明所提供的方法可从脐带中分离和培养间充质干细胞，并将获得的间充质干细胞进行进一步诱导转化，可以用于间充质干细胞的大规模生产，在再生困难的受损组织的治疗方面具有重大的意义。