本发明涉及生物技术领域，尤其是一种分离和扩增血液间充质干细胞的方法。该方法包括以下步骤：步骤a：收集血液样品，步骤b：分离血液样品中单核细胞成分，步骤c：将单核细胞成分接种于高分子材料修饰的培养皿，步骤d：分离间充质干细胞，步骤e：培养和扩增间充质干细胞。本发明使用了成分确定的包被成分对细胞培养板进行包被，有效提高了分离的纯度和效率。在α-MEM中添加b-FGF，EGF，TGF-β等细胞因子能够稳定的维持干细胞生长，能够实现血液间充质干细胞的大量扩增。