本发明公开了一种用于制备神经干细胞的试剂盒，包括神经组织保存液、神经组织洗涤液、神经组织分解液、细胞洗涤液、原代细胞培养液、细胞消化液、继代细胞培养液、细胞冻存液；本发明提供的制备神经干细胞的方法为：取得脑神经组织放入神经组织保存液中；将脑神经组织从神经组织保存液中取出，使用神经组织洗涤液漂洗；将脑神经组织切成碎块，并加入神经组织分解液消化分解；向消化分解后的液体中加入继代细胞培养液，混合液通过细胞筛，收集过滤液，并使过滤液离心处理；离心后的过滤液加入原代细胞培养液，培养后即得到P0代神经干细胞。本发明使用简单，操作方便，成本较低，培养过程较稳定，可在短时间内获得大量的神经干细胞。