本发明属于病理学技术领域，具体涉及人表皮干细胞的分离与培养方法。本发明要解决的技术问题是为人表皮干细胞的分离与培养提供一种新选择。本发明的技术方案是人表皮干细胞的分离与培养方法，包括如下步骤：a、消毒；b、分离表皮与真皮；c、收集；d、培养；e、传代。本发明方法可将人表皮干细胞至少能传到8代，极大提高了细胞扩增倍数。