本发明涉及医药生物工程技术领域，本发明提供了一种肝干细胞的特异性表面分子标志物CD63，本发明还进一步提供了该肝干细胞的特异性表面分子标志的应用。本发明利用该分子标志从肝脏中快速分离和培养扩增肝干细胞的方法，具体是应用肝干细胞的表面特异性标志物CD63，通过流式细胞仪从制备的肝脏细胞悬液中快速分离出肝干细胞。CD63+的肝干细胞在体外具有自我更新和双向分化特性，且对损伤的小鼠肝脏具有治疗作用。本发明分离获得的肝干细胞可作为肝脏药物筛选、组织化工程肝脏和肝脏疾病细胞治疗的种子细胞，也为肝脏发育以及肝干细胞的细胞生物学特性的研究提供了理想的细胞模型。