本发明公开一种胚胎干细胞(ESC)分化间充质干细胞(MSC)的方法，包括以下步骤：(1)、将ESC培养至部分ESC趋向分化状态，得到成纤维状细胞；(2)、消化步骤(1)中ESC，剩余依旧贴附的成纤维状细胞；(3)、将步骤(2)剩余的成纤维状细胞扩增培养；(4)、消化步骤(3)中的成纤维状细胞，转移至黏附细胞培养瓶中培养得到MSC。本诱导途径不用经过胚体(EB)培养过程，直接从ESC转化为MSC，更为简便；与直接用胰酶消化ESC再接种至MSC培养条件相比较，MSC诱导效率更高，诱导成功所需的时间更短。