本发明涉及一种二化螟中肠干细胞的提取、分离及鉴定方法，采用胶原酶I酶解，使中肠细胞从中肠壁上脱落下来，然后采用密度梯度离心法或流式细胞仪将干细胞与成肠细胞分离，本发明高效的得到了高纯度的二化螟中肠干细胞，可用于后续的干细胞功能研究。