本发明公开了一种软骨再生干细胞制剂及其应用，步骤包括：血清分离，分离脂肪干细胞，培养脂肪干细胞，软骨再生干细胞制剂的准备和注射治疗。自体血清培养基培养的脂肪干细胞，提高了该干细胞生长，可获得有效性关节治疗制剂；为促进脂肪干细胞转变成软骨，添加适量生长因子(TGF-beta,thrombospondin-2,BMP-2,BMP-7)，做成高效干细胞混合制剂；本发明使用了把干细胞混合制剂直接注射到关节腔这种安全方式。