本发明提出了一种富集和无分化扩增贴壁干细胞的技术，在实体肿瘤细胞的培养中，以改性干细胞培养基进行肿瘤细胞的贴壁培养，肿瘤干细胞可以逐渐形成集落，该集落具有肿瘤干细胞的特征，解决了现有技术中分离干细胞需要使用高质量的单克隆抗体，分离成本非常高，分离出的肿瘤干细胞扩增却失去或改变其干细胞的特征的问题。