本发明涉及细胞培养技术领域，特别涉及一种将T淋巴细胞诱导成多能干细胞的方法。该方法包括：将含有干细胞转录因子基因的仙台病毒转染T淋巴细胞，获得感染细胞；将感染细胞与饲养层细胞混合，采用饲养层细胞培养基进行第一培养，然后弃饲养层细胞培养基，采用胚胎干细胞培养基进行第二培养，接着采用条件培养基和人胚胎干细胞培养基的混合液进行第三培养，最后采用人胚胎干细胞培养基进行第四培养，最终获得多能干细胞。本发明选择仙台病毒作为转染载体，避免病毒的基因组整合到供体细胞的基因组中，提高了iPS细胞的安全性；选择外周血T淋巴细胞作为iPS细胞的供体细胞，供体细胞来源简单；本发明方法可成功获得多能干细胞，其多能干细胞的转化率和纯度均较高。