一种脂肪干细胞培养及其干细胞分泌物的量产方法，其步骤包括：(A)收集脂肪细胞样本；(B)分离该脂肪细胞样本中的脂肪干细胞；(C)将该脂肪干细胞种植于三维载体上，并置于一生物反应器中进行培养；(D)收集由该脂肪干细胞分泌的干细胞分泌物；其中该干细胞分泌物至少包括血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、介白素-6、1型胶原蛋白其中之一或其组合。由此，可省去繁复操作步骤与人力、设备等经济成本，并可快速大量培养脂肪干细胞及生产其干细胞分泌物，未来可应用于疾病治疗、细胞修复及再生医学领域。