本发明涉及注射用美洛西林钠的制备方法。该方法包括下述步骤：先向经灭菌预处理的注射剂瓶充入经0.22μm膜过滤器过滤的氮气，然后将比旋度为＋190°～＋195°的美洛西林钠分装到注射剂瓶中，药品分装后再向药品充入氮气，然后盖上经预处理的胶塞，最后送入轧盖室采用铝盖进行轧盖即得注射用美洛西林钠。本发明选择比旋度为＋190°～＋195°、pH值为7.0～7.5的美洛西林钠制成注射制剂，其药物稳定性更好，作为注射制剂更为安全。