本发明涉及含有9-硝基喜树碱的混合胶束冻干粉针剂及其制备方法。该制剂以9-硝基喜树碱为有效成分并含有磷脂，胆盐，冻干保护剂和其它辅料组成。其中9-硝基喜树碱、磷脂、胆盐、冻干保护剂及其它辅料的比例为1:1~45:5~70:10~150:适量。本发明制备成的冻干粉针剂，不仅能够有效解决9-硝基喜树碱在水中难溶的问题，而且能够显著提高药物的生物利用度。本发明制备工艺简单，适合工业化生产，稳定性好，疗效好。