本发明公开了一种10-羟基喜树碱-丁二酸与腺病毒的结合物，其制备方法为：利用10-羟基喜树碱与丁二酸酐在无水吡啶中通过4-二甲氨基吡啶催化，使10-羟基喜树碱上的羟基与丁二酸酐的羧基反应，生成HCPT-SA；HCPT-SA和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐在N，N-二甲基甲酰胺中通过N-羟基琥珀酰亚胺进行反应，然后加入腺病毒进行暗反应；从而使HCPT-SA上的羧基与腺病毒衣壳蛋白的氨基反应构成10-羟基喜树碱-丁二酸与腺病毒的结合物。上述10-羟基喜树碱-丁二酸与腺病毒的结合物的用途为：在制备用于抗肿瘤的药物中的应用。