本发明公开了一种核桃叶水提物的制备方法及所得的核桃叶醇液和应用，制备方法包括以下步骤：将核桃叶干燥、用水浸泡，然后加热煮沸，收集馏出成分，即为核桃叶水提物。本发明针对核桃废叶多、未充分利用的问题，以核桃废叶为原料，采用简单的水煮蒸馏的方法提取核桃叶中的有效成分，变废为宝，为核桃叶的药用有效成份的研究提供一种简单易行、清洁高效的制备方法，所得的核桃叶醇液经验证具有抑菌、抑制癌细胞再生的功效，可用于抗肿瘤药物领域。